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Detección de reordenamientos de TCR-γ en material parafinado de Micosis Fungoide mediante Genescan.

Autor/es
N. Pérez, F. Rojo, S. Zazo, R. Rincón, R. Mullor, S. Córdova, L. Daoud, C. Medina, J. Madoz, R. Bragado, J.L. Requena y F. Manzarbeitia.
Fundación Jiménez Díaz
nperez@fjd.es
Orden de Presentacion
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INTRODUCCIÓN: La Micosis Fungoide (MF) es un tipo de linfoma NH, que afecta principalmente a la piel. Es el tipo más común de LCCT que mayores dificultades diagnósticas presenta, sobre todo en su fase inicial ya que los criterios empleados en su diagnóstico, aparecen aisladamente en otros procesos benignos. El reordenamiento génico del receptor de células T (TCR-Υ) se baraja como posible causa de esta patología, que se caracteriza por una inusual expresión de células T CD4 de forma que la relación CD4/CD8 resulta>10. Inmunohistoquímicamente las células de MF son: CD2+, CD3+, CD4+, CD5+, CD7-, CD8-, CD45RO+, presentan un núcleo hipercromático de forma irregular y se conocen como -"células cerebriformes"-. El pronóstico depende de, la edad del paciente, la etapa de la enfermedad y la presencia o no de afectación extracutánea. Pacientes con lesiones en estadios iniciales, sobreviven más de 15 años y aquellos con lesiones extracutáneas tienen una supervivencia a 5 años del 40%. El objetivo de este trabajo es el estudio de la sensibilidad del análisis del reordenamiento del receptor de células T (TCR-Υ) del material parafinado como herramienta diagnóstica útil en MF, dadas las dificultades que presenta el diagnóstico histológico de la misma al inicio de su desarrollo.MATERIAL Y MÉTODOS: se realizaron estudios moleculares de reordenamientos de las cadenas pesadas de las inmunoglobulinas (secuencias FR1, FR2, y FR3 Operon) y del receptor de linfocitos T (TCR-Υ Operon) según secuencias consenso BIOMED-2 en los 30 casos con sospecha de MF recibidos durante el año 2009. Se extrajo ADN de biopsias de piel fijadas en formol y embebidas en parafina mediante el extractor autómatico QIACUBE y el QIAmp DNA FFPE Tissue kit para realizar PCR de reordenamientos IgH y del receptor de linfocitos T con resolución mediante Electroforesis Capilar en ABI3130 y sistema de lectura Genescan.CONCLUSIONES: la sensibilidad del reordenamiento TCR-Υ en la MF a partir de material parafinado es del 64% y la especificidad del 100%, por lo que se puede concluir que el uso de técnicas de biología molecular en las lesiones con sospecha de MF, facilita su abordaje diagnóstico, en especial, mediante la utilización de sistemas de alta sensibilidad como el Genescan.